实验目的

　　为了提?贮存稳定性、降低?醇残留量，将卡巴他赛纳?脂质体制备成冻?注射剂，并对冻??艺进?了研究与优化。以冻?产品的外观、主药含量、包封率、?分含量、?醇残留量、贮存稳定性为评价指标，考察了冻??；ぜ?(蔗糖) ?量、料液装量、预冻速度、?燥温度对产品质量的影响。

实验步骤

冻干保护剂的选择及用量

　　冻?过程中会产?冰晶?破坏脂质体结构。通常，为了保护脂质体的结构，会加?冻??；ぜ?，如海藻糖、蔗糖、乳糖、?露醇等。前期研究表明，?露醇作为冻??；ぜ潦北；ばЧ喜?、粒?易聚集；乳糖作为冻??；ぜ潦钡谋；ばЧ胝崽窍嘟?，但部分患者的乳糖耐受性较差；海藻糖属于注射级辅料，作为冻??；ぜ潦北；ばЧ步虾茫鄹窠?。综上所述，本研究选?蔗糖为冻??；ぜ?，以冻?产品的外观、?分、复溶再分散时间(t再分散，指冻?产品完全溶解所?时间) 为评价指标，考察蔗糖与磷脂的质量?对冻?产品质量的影响。

冻干工艺优化

　　冷冻?燥过程包括预冻和?燥。为了降低能耗、提?效率，本研究从预冻阶段降温速度、?次?燥温度、?次?燥温度3个??对冻??艺进?研究与优化，以缩短冻?周期。

　　2.1 预冻阶段

　　预冻阶段中料液的冻结程度或状态会直接影响后续?燥过程的效率和产品质量，依据1纳?脂质体混悬液的共晶点，将预冻温度设为 –40 ℃。采?电阻法判断样品的冻结程度，考察隔板从室温降到-40 ℃所?时间(t1)对冻?脂质体产品质量的影响。

　　2.2 ?次?燥阶段

　　?次?燥?称升华?燥，主要?的是除去产品中的?结合?。该阶段的主要?艺参数是升华?燥温度和?燥时间(t升，指从?次?燥开始到?线完全消失及之后继续保温2 h的总时?)。依据1纳?脂质体混悬液的共熔点，分别选择-15℃和-10℃作为升华?燥温度进?考察。设计?次?燥?案如表所?，记录?线消失时间，并对制得的冻?产品的外观、t 再分散、?分含量等指标进?评价。

　　2.3 ?次?燥阶段

　　?次?燥?称解析?燥，主要?的是去除在?次?燥中?法去除的、未冻结的部分吸附?和结合?，其?燥效果主要受?燥温度影响。由于实验室?常温度约为24℃，为了避免出箱温度低于环境温度?使空?中的?分凝结在产品上导致产品吸湿，将?次?燥温度设置在 24℃以上。同时，结合辅料的热稳定性，考察了?次?燥温度分别为25℃和28℃对冻?产品质量的影响。记录?燥终点，并对冻?产品的外观、t再分散、?分含量及室温 (放置24 h)和4℃ (放置48 h)下稳定性 (粒径、PDI、pH值) 进?评价。

实验结果

冻干?；ぜ恋难≡窦坝昧?/p>

表1 冻?保护剂?量对冻?纳?脂质体质量的影响

　　可?，当m糖/m脂=5.0或7.5时，冻?产品表?平整、?塌陷，但m糖/m脂=7.5时，产品中?分含量较?，约为m糖/m脂=5.0时产品的3倍，因此，选择m糖/m脂=5.0 进?后续研究。

冻干工艺优化

　　2.1 预冻阶段

　　试验结果表明，当t1=20 min 时，冻?产品的颗粒较细腻 ;当t1=90 min 时，冻?产品的颗粒较粗糙;于-40℃保持3 h时，电阻值较?，此时1纳?脂质体混悬液完全冻实，继续在-40℃保持2 h后，进?升华?燥阶段。由于粒?细腻的冻?脂质体产品引湿性较强，不利于保存;并且降温速度过快易形成较多粒径较?的冰晶?损伤脂质体膜，?慢速降温则可形成较?的冰晶，可避免破坏脂质体膜。此外，缩短隔板降温时间对冻?机的性能要求较?，且在?燥过程中需要更多的能量才能达到预期的?燥效果，因此设置 t1=90 min。 综上所述，优化后预冻阶段?艺参数为：预冻温度-40℃，t1=90 min，隔板降温到-40℃时，保温时间(t2)=5 h。

　　2.2 ?次?燥阶段

　　结果显?，?案①所得冻?产品呈??花篮状，表?塌陷严重，不符合1纳?脂质体冻?粉的外观要求，且复溶性差 ;??案②所得1纳?脂质体冻?粉紧贴瓶壁，呈疏松的??圆柱形块状物，表?平整，其?线消失时间为12 h，t再分散=20 s，?分含量为1.0%，贮存稳定性良好，且包封率较? (表3)。因此本研究将升华?燥温度设为-15℃，t升设为14 h。

表2 ?次?燥的冻?参数设计

表3 ?案②制备的冻?注射剂的贮存稳定性及包封率

　　2.3 ?次?燥阶段

　　结果如表4所?，?次?燥温度为25或28℃时，所得冻?产品的外观均为紧贴瓶壁的??圆柱形疏松块状物，表?平整、?塌陷，且t再分散均为20 s，?分含量均低于2%，其他各项评价指标均相近且表现良好。?次?燥温度为25和28℃时，到达?燥终点所需时间分别为61.50和48.83 h，t解分别为40.67和28.00 h。为了节约时间、减少能耗，本研究将解析?燥温度设为28℃，解析?燥时间设为28 h，冻?全程总耗时为48.83 h。

表4 ?次?燥温度对冻?纳?脂质体质量的影响

优化的冻干工艺

　　综上所述，优化冻??艺为：蔗糖与磷脂的质量?为5.0；脂质体中卡巴他赛质量浓度为2mg/mL，规格为每瓶20mg；?林瓶选?20或30mL的规格，当?林瓶规格为20mL时，料液与?林瓶体积?为1∶2，当?林瓶规格为30mL时，料液与?林瓶体积?为1：3；采?阶段式升温，冻?曲线如图1所?，预冻温度为-40℃，隔板降温时间为 90 min，-40℃时保温5h；?次?燥温为-15℃，?次?燥时间为14h；?次?燥温度为28 ℃，?次?燥时间为28h。